Тернопольская городская детская больница, Тернопольский государственный медицинский  университет им. И.Я. Горбачевского, Украина  (Бутницький Ю.І. Застосування методів виявлення Helicobacter pylori в ендоскопічному  кабінеті / Ю. І. Бутницький, В. Ф. Лобода // Український журнал малоінвазивної та ендоскопічної хірургії. – 2010. – № 2 (14). – С. 23.)

В статье описывается использование бактериоскопического и биохимиического методов обнаружения) Helicobacter pylori в условиях эндоскопического кабинета.
Актуальность лечения геликобактериоза у детей и взрослых остается важной темой в исследованиях гастроэнтерологов на протяжении многих лет. Существуют различные методы обнаружения Helicobacter pylori (Нр) - прямые и косвенные, инвазивные и неинвазивные, из разных сред организма [2]. Большинство из них являются трудоемкими или дорогими, а потому недоступны для рутинного использования в большинстве лечебных учреждений нашей страны. Благодаря многолетнему опыту, мы в своей статье хотим обратить внимание на практическую сторону в применении общеизвестных методик выявления Нр. Тем более, что данные исследования доступны для внедрения и повседневного использования в условиях любого медицинского учреждения в котором выполняется гастродуоденоскопия [3]. Следовательно, для определения Нр мы в своей работе применяем два метода: биохимический и бактериоскопический. 
Для биохимического метода, так называемого быстрого уреазного теста, используем методику предложенную Мороз Г.З. [4]. Для приготовления уреазного теста к 1 мл 10% раствора мочевины добавляем 2 капли 1% раствора фенол-рота. После погружения в него биоптата, в случае положительного результата, светло-желтый цвет меняется на малиновый (рис.1).

Растворы реактивов можно готовить в биохимической лаборатории, где есть аптечные весы и набор навесок. При этом, необходимо осторожно обращаться с фенолротом, который является очень сыпучим порошком и требует аккуратности в взвешивании. Раствора фенол-рота объемом 20-30 мл хватает примерно на полгода (при нагрузке 2-3 исследования в день). Готовые растворы желательно держать в холодильнике, потому что со временем (примерно через 2-3 недели) при добавлении фенол-рота в мочевину уреазный тест сразу меняет свой цвет на малиновый. Мы, предварительно готовим 20-30 мл раствора 
мочевины, что при нашей нагрузке разрешило использовать 300 г порошка этого реактива  3 почти два года. Следовательно, себестоимость данного метода исследования по сравнению с закупкой готовых уреазных тестов будет минимальной.

Рис.1. Изменение цвета со светло-желтого на малиновый в уреазном тесте при Helicobacter pylori-ассоциированной патологии Уреазный тест, при погружении в него кусочка биоптата, в некоторых случаях меняет свою окраску почти сразу, в других через 30-40-60 мин, и даже позже.

Мы расцениваем как положительный результат, изменение цвета раствора до 1 часа при комнатной температуре. Хотя есть публикации, в которых авторы наблюдают за изменением цвета реактива до суток и объясняют такую динамику, степенью обсеменения слизистой оболочки желудка Нр. 
Что касается бактериоскопического метода, то для этого необходимо будет вспомнить навыки работы со световым микроскопом. Хотя на первый взгляд, казалось бы, проще, чтобы это обследование осуществлял клинический лаборант, но со временем энтузиазм последнего уменьшается и со временем становится проблематичным требовать от него оперативности в оценке мазка. Итак, после удаления материала из чашечек биопсийных щипцов, иглой от шприца осторожно растираем край биоптата со слизью (слизь это принципиально, поскольку в нем и находятся Нр) по предметному стеклу ровным слоем примерно площадью 1 см2. 
Хотя площадь мазка особого значения не имеет, в некоторых случаях при минимальном количестве слизи, сразу находили Нр, а при казалось более чем достаточном объеме,полученного материала, процесс поиска был довольно длительным. Остаток кусочка биоптата помещаем в уреазный тест. Приготовленный мазок фиксируем 96% этиловым спиртом, высушиваем естественным путем в кабинете. Затем красим по Романовскому-Гимзе (в клинической лаборатории таким методом окрашиваются мазки для общего анализа крови) до 20 минут. Краска смывается, предметное стекло высушивается. При увеличении 1350 (окуляр х15, объектив х90) применяя иммерсионное масло, обследуем мазок в нескольких полях (микроскоп ЛОМО "Биолан").

Искать  необходимо среди слизи. Клетки Нр имеют вид прямых или изогнутых (С-или S-образно) темно-синих или сине-фиолетовых палочек длиной 2-6 мкм (рис. 2).